每周一鼠Ppia基因敲除小鼠与免疫研 [复制链接]

赛业生物《每周一鼠》，每周五更新，为大家讲解一个小鼠模型的故事，希望对大家了解不同的小鼠模型有所帮助。今天和大家见面的是Ppia基因敲除小鼠。

Ppia基因

该基因编码肽基脯氨酰顺反异构酶（PPIase）家族的成员。其编码的蛋白质是一种环孢菌素结合蛋白，可能在环孢菌素A介导的免疫抑制中发挥作用。该蛋白还可以与几种HIV蛋白相互作用，包括p55gag、Vpr和衣壳蛋白，并且已被证明是形成感染性HIV病毒粒子所必需的。其相关通路有催乳素信号通路。

图1.Ppia蛋白结构。

Ppia基因敲除小鼠

1●免疫异常表型

ColganJ等人通过ES打靶技术，敲除Ppia基因1~4号外显子及部分5号外显子序列得到Ppia敲除小鼠（图1）[1]。研究发现，Ppia敲除小鼠（Ppia-/-）会自发出现眼睑肿胀、红斑，3月龄出现眼睑缘炎症，髓年龄增长病情加重。结膜和皮肤有单核细胞、嗜酸性粒细胞和肥大细胞浸润，血清IgG1和IgE含量升高。KLH（Calbiochem）免疫10天后，血清抗原特异性IgG1和IgE含量升高（图2）[1]。

图2.Ppia/小鼠的免疫异常表型。

图注：（A）：Ppia敲除小鼠打靶策略与鉴定。(B)：Ppia-/-小鼠的眼睑炎症。(C)：苏木精/伊红染色切片显示Ppia-/-眼睑(40×)中的细胞浸润。(D)：用刚果红（左；×；箭头，嗜酸性粒细胞）或甲苯胺蓝（右，×；箭头，肥大细胞）染色的Ppia-/-眼睑。(E)：未免疫小鼠中血清IgG1和IgE的浓度。(F)：KLH免疫小鼠血清中的相对抗原特异性抗体和IgE浓度。

2●抗病毒表型

LiuW等人用SeV病毒（仙台病毒）感染5只WT小鼠和5只Ppia-/-小鼠，5只Ppia-/-小鼠在感染9天后全部死亡，WT小鼠存活3只并保持健康。病理解剖学发现，SeV感染的Ppia-/-小鼠的肺指数高于WT小鼠，肺脏损伤严重。组织病理学结果表明，SeV感染的Ppia-/-小鼠表现为严重的支气管肺炎、间质性肺炎、血管充血并且脱落，WT小鼠仅表现为轻微的支气管肺炎和血管充血。Ppia-/-小鼠肺中病毒载量更高，并且肺和脾脏中一型干扰素和下游ISG含量降低（图2）。结果表明，Ppia通过增加IFN和下游ISG的表达来抑制体内SeV复制[2]。

图2.Ppia抗病毒反应。

图注：(A)：通过鼻腔接种感染SeV(PFU/小鼠)，并监控感染后14天内WT和Ppia-/-小鼠(n=5)的存活率。(B)：感染SeV2天和7天的WT和Ppia-/-小鼠(n=5)的肺指数(×肺/体重)。(C)：用SeV接种7天的WT和Ppia-/-小鼠肺部的总体损伤。(D)：感染SeV或模拟感染PBS2、5和7天的WT和Ppia-/-小鼠(n=3)的肺的HE染色。比例尺，μm。（E）：在指定时间点用SeV处理的WT或Ppia-/-小鼠中SeVNP或MmRNA的定量PCR分析。(F)：用SeV处理指定时间点的WT或Ppia-/-小鼠肺组织中IFN-β和IFN-α含量。（G和H）在指定时间点用SeV处理的WT或Ppia-/-小鼠肺组织中Ifnb1、Ifna（G）、Ifit1、Ifit2和Ccl5（H）mRNA的定量PCR分析。数据显示为平均值±SD（B：n=5;E-H:n=3）。*p0.05和**p0.01。

参考文献：

1.ColganJ,AsmalM,NeaguM,YuB,SchneidkrautJ,LeeY,SokolskajaE,AndreottiA,LubanJ.CyclophilinAregulatesTCRsignalstrengthinCD4+Tcellsviaaproline-directedconformationalswitchinItk.Immunity.Aug;21(2):-.doi:10./j.immuni..07..PMID:15308.

2.LiuW,LiJ,ZhengW,ShangY,ZhaoZ,WangS,BiY,ZhangS,XuC,DuanZ,ZhangL,WangYL,JiangZ,LiuW,SunL.CyclophilinA-regulatedubiquitinationiscriticalforRIG-I-mediatedantiviralimmuneresponses.Elife.7Jun8;6:e.doi:10./eLife..PMID:;PMCIDMC.

3.WangJ,LiX,WangY,LiY,ShiF,DiaoH.Osteopontinaggravatesacutelunginjuryininfluenzavirusinfectionbypromotingmacrophagesnecroptosis.CellDeathDiscov.Mar4;8(1):97.doi:10./s---x.PMID:.

4.DingXM,WangYF,LyuY,ZouY,WangX,RuanSM,WuWH,LiuH,SunY,ZhangRL,ZhaoH,HanY,ZhaoBT,PanJ,HanXY,WangCR,ZhaoHL,YangGL,LiuLZ,FangSS.TheeffectofinfluenzaA(H1N1)pdm09virusinfectiononcytokineproductionandgeneexpressioninBV2microglialcells.VirusRes.Feb28:.doi:10./j.virusres...Epubaheadofprint.PMID:35244.

5.XieD,HeS,HanL,WuL,HuangH,TaoH,ZhouP,ShiX,BaiH,BoX.Systematicoptimizationofhost-directedtherapeutictargetsandpreclinicalvalidationofrepositionedantiviraldrugs.BriefBioinform.Mar3:bbac.doi:10./bib/bbac.Epubaheadofprint.PMID:.